عند الدخول إلى الخلية ، يرتبط Trypan Blue بـ البروتينات داخل الخلايا مما يجعل الخلايا لونًا مزرقًا. يسمح اختبار استبعاد التريبان الأزرق بتحديد وتعداد مباشر للخلايا الحية (غير ملوثة) والميتة (الزرقاء) في عدد معين من السكان.
ما هي مشكلة تلطيخ التريبان الأزرق؟
قد يزيد تلطيخ الخلايا ذات اللون الأزرق التريبان بسرعة وتمزق غشاء الخلية الهش بالفعل والهيكل الخلوي (3،20-22).
لماذا تريبان الأزرق والإريثروسين تستخدم لتمييز الخلايا الحية والميتة؟
‘إنها الصبغة الأكثر استخدامًا في مختبرات الأبحاث لتقييم قابلية الخلية. إنها صبغة غير منفذة لا يمكنها اجتياز غشاء الخلايا السليمة للخلايا الحية ، على عكس أغشية الخلايا الميتة التي يمكن أن تخترق.
هل يمكن للبكتيريا وصمة عار التريبان؟
Trypan Blue عبارة عن صبغة تم استخدامها على نطاق واسع لتلطيخ الانتقائي للأنسجة الميتة أو الخلايا. هنا ، نظهر أن السموم المكونة للسموم Hlyii من Bacillus cereus يسمح تلطيخ التريبان الأزرق لخلايا البلاعم ، على الرغم من أن الخلايا تبقى قابلة للحياة ونشطة الأيض.
كيف تستخدم التريبان الأزرق لحساب الخلايا؟
أضف 0.1 مل من محلول المخزون الأزرق التريبان إلى 0.1 مل من الخلايا . قم بتحميل عقيد الهيماسيكي وفحصه مباشرة تحت المجهر عند التكبير المنخفض. حساب عدد الخلايا تلطيخ الأزرق وعدد إجمالي الخلايا. يجب أن تكون صلاحية الخلية 95 ٪ على الأقل للثقافات الصحية السجلات.
هل تريبان زرقاء سامة للخلايا؟
الاستنتاجات: Trypan Blue ليس سامًا ، من حيث صلاحية الخلية ، على مدى وقت تعرض يصل إلى الستينيات ؛ ومع ذلك ، يؤدي التعرض الإضافي إلى زيادة تدريجية في تلف خلايا الشبكات التربيقية البشرية المثقفة. الكلمات الرئيسية: السمية ، خلية أعمال الشبكات التربيقية ، التريبان الأزرق ، الجدوى.
هل التريبان الأزرق دقيق؟
يتم استبعاد الصبغة من الخلايا الحية الغشائية ، ولكن يمكن أن تدخل وتركز في الخلايا الميتة التي تنقصها الغشاء ، مما يجعل الخلايا زرقاء داكنة. على مر السنين ، كان هناك فهم أن Trypan Blue غير دقيق لصلاحية الخلية أقل من 80 ٪ دون دعم علمي .
كيف يتم تحليل التريبان الأزرق؟
البروتوكول الأساسي
في هذا الاختبار ، يتم خلط تعليق الخلية مع صبغة ثم يتم فحصه بصريًا لتحديد ما إذا كانت الخلايا تأخذ أو تستبعد صبغة . في البروتوكول المقدم هنا ، سيكون لخلية قابلة للحياة السيتوبلازم الواضح في حين أن الخلية غير القابلة للحياة ستحتوي على السيتوبلازم الأزرق.
لماذا يتم استخدام التريبان الأزرق في جراحة الساد؟
من هذه ، الأزرق التريبان هو الأكثر استخدامًا في جراحة الساد بسبب لسلامتها وتوافرها وفعاليتها . تم استخدام Trypan Blue في جراحة الساد منذ أواخر التسعينيات من القرن الماضي لتلقيح الكبسولة الأمامية وتحسين الرؤية للجراح.
ما هو التريبان الأزرق المصنوع من؟
Trypan Blue هو ملح عضوي هو ملح رباعي البترات من 3،3′-bis (5-amino-4-hydroxynaphthalene-2،7-disulfonic acid) . له دور كصبغة النسيجية ، الفلوروكروم وعامل السرطانات. إنه ملح عضوي وملح صوديوم عضوي.
هل التريبان الأزرق مادة مسرطنة؟
Trypan Blue عبارة عن صبغة Azo تستخدم على نطاق واسع لاختبار قابلية خلية الخلية. تم تحديد الصبغة على أنها mutagen وسرطان .
هل التريبان زرقاء قابل للذوبان؟
صبغة التريبان الأزرق هي صبغة آزو ، مشتقة من التولويدين. قابل للذوبان في الماء وله وزن جزيئي يبلغ 961 جم/مول.
هل Trypan Blue Light حساس؟
حتى الآن ، تم اعتبار التطبيق داخل العين لـ Trypan Blue آمنًا نسبيًا داخل الجزء الأمامي ، في حين أظهرت التحقيقات السريرية والتجريبية على أنسجة الشبكية سمية تعتمد على الجرعة والوقت والضوء.
هل مضان التريبان الأزرق؟
لا يمكن أن يخترق Trypan Blue غشاء الخلايا الحية ، وسيقوم بإبلاغ جميع مضان من MSN الممتز جسديًا على غشاء الخلية. وبالتالي ، عندما يتم استخدام التريبان الأزرق ، فإن التألق الذي تم اكتشافه بواسطة التدفق الخلوي هو من الخلايا مع MSN الفلورسنت الداخلي أو التألق الذاتي للخلية.
كيف تميز التريبان الأزرق عن الخلايا المعيشية والميتة؟
هذا Gibco Trypan Blue يتلطى بين الخلايا الميتة ويوفر تمييزًا بصريًا جيدًا بين الخلايا الحية والميتة. تأخذ الخلايا الميتة ذات الغشاء الخلوي المسامي تناول الصبغة والخلايا الحية مع غشاء الخلية السليمة.
هل التريبان الأزرق مثل الميثيلين الأزرق؟
بالمقارنة مع عد الخلايا الزرقاء التريبان التقليدية على مقياس الدم ، فإن نتائج اختبار الميثيلين الأزرق هي أكثر دقة وأكثر موثوقية (الشكل 4). يتمتع اختبار الميثيلين الأزرق بمزايا واضحة على الطرق التقليدية للعديد من التطبيقات ، بما في ذلك عد الخلايا (مثل منحنيات النمو ، الشكل
كيف تخزن التريبان الأزرق؟
شروط التخزين
يتم توفير محلول التريبان الأزرق 0.4 ٪ في درجة الحرارة المحيطة . عند الوصول إلى متجر في درجة الحرارة المحيطة. المنتج مستقر لمدة عام واحد عند تخزينه حسب التعليمات.
هل خلايا الدم الحمراء لصمة الأزرق التريبان؟
خلايا الدم الحمراء (RBCs) ، وكذلك PBMCs غير الصحية ، سوف تلطخ الظلام مع التريبان الأزرق ، وبالتالي تشبه الخلايا الميتة.
كيف تحل التريبان الأزرق؟
Trypan Blue Stain (0.4 ٪)
حل 0.4 جم من التريبان الأزرق في 80 مل من 1ã – PBS واتركي غليان بطيء. تبرد إلى درجة حرارة الغرفة ، وأضف PBS إلى حجم نهائي قدره 100 مل.
كيف يتم حساب قابلية التريبان الأزرق؟
الخلايا الميتة زرقاء لأن التريبان الأزرق يمكن أن يتخلل فقط أغشية الخلايا التالفة ؛ يمكنك حساب صلاحية الخلية باستخدام الصيغة التالية: 100*(الخلايا الحية)/(الخلايا الميتة + الخلايا الحية) .
ما هي غرفة Neubauer؟
غرفة Neubauer هي شريحة بلورية سميكة بحجم شريحة زجاجية (30 × 70 مم وسمك 4 مم). في غرفة العد البسيطة ، المنطقة المركزية هي حيث يتم تنفيذ تعداد الخلية.
لماذا يعد حساب الخلية مهمًا؟
أهمية عد الخلايا
تعتبر تعداد الخلايا مهمة لمراقبة معدل صحة الخلايا ومعدل الانتشار ، وتقييم الخلود أو التحول ، وخلايا البذر للتجارب اللاحقة ، والترنسفكأيشن أو العدوى ، و التحضير للمقايسات القائمة على الخلية.