الإجابة: بورومايسين عبارة عن مضادات حيوية أمينووكليوسيد ، مستمدة من بكتيريا الستربتومسيس ألبونيجر ، والتي تسبب إنهاء السلسلة المبكرة أثناء أخذ الترجمة في الريبوسوم. يشبه جزء من الجزيء نهاية trna 3 ‘
هل يقتل بورومايسين الخلايا البشرية؟
الجرعة الموصى بها كعامل اختيار في الثقافات الخلوية تقع ضمن نطاق من 1-10 î¼g/مل ، على الرغم من أنها قد تكون سامة للخلايا حقيقية النواة بتركيزات منخفضة تصل إلى 1 î¼g/مل. يعمل بورومايسين بسرعة ويمكن أن يقتل ما يصل إلى 99 ٪ من الخلايا غير المقاومة في غضون يومين .
ما الذي يستخدم بورومايسين؟
puromycin هو مضاد حيوي يمنع ترجمة البروتين البكتيري . يتم استخدامه كعامل انتقائي في ثقافات الخلايا المختبرية. بورومايسين سام لكل من الخلايا بدائية النواة وذات النواة ، مما يؤدي إلى موت خلية كبير في جرعات مناسبة.
ما هي مدة استمرار الوسائط بوروميسين؟
الاقتراحات: 1) إذا كنت بحاجة إلى إضافة بورومايسين إلى الوسائط الخاصة بك ، فاترك الوسائط في درجة حرارة الغرفة لتسخين من التخزين 4C بدلاً من استخدام Waterbath. هذا سيبقيه مستقرًا لـ ~ 3 أسابيع .
ما نوع المضادات الحيوية التي هو بورومايسين؟
puromycin هو مضاد حيوي أمينووكليوسيد الذي ينتجه الستربتومسي ألبونيجر. إنه يمنع على وجه التحديد نقل الببتيديل على كل من الريبوسومات بدائية النواة وذاتي النواة. هذا المضادات الحيوية يمنع نمو البكتيريا الإيجابية للجرام والخلايا الحيوانية والحشرات المختلفة.
ما مدى سرعة قتل الخلايا البروميسين؟
معايرة puromycin
يجب الوصول إلى الفعالية المثلى في 1-4 أيام . الحد الأدنى لتركيز المضادات الحيوية لاستخدامه هو أدنى تركيز يقتل 100 ٪ من الخلايا في 3-5 أيام من بداية اختيار بوروميسين.
ما مقدار بورومايسين يجب أن أتناوله؟
المضادات الحيوية بورومايسين يضمن اختيارًا إيجابيًا فعالًا للخلايا التي تعبر عن جين بورومايسين-الأسيتيل-ترانساز (PAC). في خلايا الثدييات ، يكون نطاق تركيز العمل الموصى به للبوروميسين 0.5 – 10 µg/مل.
كيف تعالج الخلايا مع بورومايسين؟
كانت الطريقة التي استخدمناها مؤخرًا هي نقل الخلايا وفقًا للإجراء الطبيعي ، ثم بعد 24 ساعة ، تعامل مع بورومايسين. ستحتاج إلى القيام بمنحنى قتل بورومايسين على خلاياك أولاً للتحقق من تركيز بورومايسين يقتل 100 ٪ من الخلايا غير المنقولة. عادة بين 1-10UG/مل الأعمال.
ماذا تخفف من بورومايسين في؟
باستخدام مخزون 1mg/ml من بورومايسين ، قم بإعداد خمسة تخفيفات بتركيز نهائي 2x ، عن طريق تخفيف المخزون في الوسائط كما هو موضح في الجدول 1 ، العمود C & D. (عندما يتم تخفيف تركيز المضادات الحيوية 2x مع حجم متساوٍ من تعليق الخلية سيؤدي إلى التركيز النهائي الموضح في الجدول 1 ، العمود ب).
كيف تصنع مخزون بورومايسين؟
هذا المنتج قابل للذوبان في الماء عند 50 ملغ/مل. يجب تحضير محلول المخزون عن طريق الترشيح باستخدام مرشح 0.22 î¼m ثم تخزينه في قسامات عند -20 درجة مئوية. هذا المنتج قابل للذوبان أيضًا في الميثانول عند 10 ملغ/مل.
ما هو المستخدمة من Anisomycin لـ؟
تم استخدام Anisomycin على نطاق واسع باعتباره مثبط لتوليف البروتين في الدراسات على التعلم والذاكرة وكذلك اللدونة المتشابكة . ومع ذلك ، فإن طريقة عملها معقدة. إلى جانب تثبيط الترجمة ، يعرض هذا الدواء آثارًا أخرى ، بشكل بارز على كيناز البروتين المنشط للميتوجين.
ما هو اختيار G418؟
gibcoâ geneticinâ® antibiotic Selective (G418 sulfate) يستخدم كمضادات حيوية انتقائية في نطاق تركيز 100 – 200 µg/مل للبكتيريا ، أو 200 – 500 µg/مل ل معظم خلايا الثدييات. يتم توفير هذا المنتج كحل 50 ملغ/مل في الماء. نحن نقدم مجموعة متنوعة من المضادات الحيوية لثقافة الخلايا لراحتك.
كيف يعمل عرض مرنا؟
شاشة mRNA هي تقنية عرض تستخدم للبروتين في المختبر ، و/أو تطور الببتيد لإنشاء جزيئات يمكن أن ترتبط بالهدف المطلوب . … يتم بعد ذلك نسخ الانصهار البروتين mRNA التي تربط بئر إلى [كدنا] وتضخم تسلسلها عن طريق تفاعل سلسلة البوليميريز.
متى يجب أن أبدأ اختيار بورومايسين؟
يتم تحديد التحديد (إضافة بورومايسين إلى وسائط ثقافة الخلية) حوالي 24 ساعة بعد ترنسفكأيشن . يمكنك أيضًا بدء التحديد في 48 ساعة اعتمادًا على صحة خلاياك المنقولة.
كيف تخزن بورومايسين؟
التخزين والاستقرار:
يتم شحن بورومايسين في درجة حرارة الغرفة . عند الاستلام ، يجب تخزينه عند 4 درجة مئوية أو -20 درجة مئوية. بوروميسين مستقر لمدة عامين عند -20 درجة مئوية ، وسنتين عند 4 درجة مئوية ، و 3 أشهر في درجة حرارة الغرفة. تجنب دورات الجليد المتكررة.
هل بورومايسين قابل للذوبان في الماء؟
المنتج قابل للذوبان في الماء (50 ملغ/مل) ، مما يؤدي إلى محلول صفراء واضح إلى اللون غير ملون. قد يتم تمرير محلول المخزون من خلال مرشح 0.22 µm وتخزينه في قسامات في â € 20  ° C. كما أنه قابل للذوبان في الميثانول (10 ملغ/مل).
هل الضوء بورميسين حساس؟
puromycin dihydrochloride هو حساس للضوء على Par مع حساسية الضوء لمعظم الوسائط القاعدية مثل DMEM و RPMI 1640. نوصي بحد التعرض لهذا المنتج لتسليط الضوء على قدر الإمكان (أي ،. < /p>
كيف تنقل فيروسات Lentivect الخلايا؟
c. transduction
- ذوبان فيروس Lentivirus على الجليد. مزيج 8 µl polybrene (1 ملغ/مل قسامة) مع 957 µl ثقافة. …
- في اليوم التالي ، تبادل الخليط Lentivirus/polybrene بواسطة وسط الثقافة الطازجة. احتضان الخلايا في ظروف ثقافة الخلية القياسية. …
- تتراوح التركيزات من 0.1-10 î¼g/مل. استبدل متوسط الثقافة 48-72 ساعة.
كيف تصنع خط خلية مستقرة؟
يتطلب البروتوكول لتوليد خطوط الخلايا المستقرة عدة خطوات كما هو موضح أدناه:
- قم بإنشاء منحنى القتل لتحديد تركيز المضادات الحيوية الأمثل.
- نقل الخلايا مع بناء (S) البلازميد المطلوب
- حدد وتوسيع مستعمرات متعددة النسيلة مستقرة.
- حدد الحيوانات المستنسخة المفردة عن طريق التخفيف والتوسع المحدود.
ما هو المضادات الحيوية التي تمنع الترجمة في كل من بدائيات النوى وحقوق النواة؟
المضادات الحيوية التي تمنع الترجمة. puromycin يعمل على كل من الخلايا بدائية النواة وذات النواة. إنه يحتوي على بنية مشابهة لنهاية 3 € ² لحامل الأمييناكل-رنا من التيروزين أو فينيل ألانين.